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Hematologia e Bioquímica Sérica

Coleta:

Exames de Hematologia e Bioquímica sanguínea podem ser executados preferencialmente com sangue venoso. Nos grandes ruminantes e equídeos, a veia jugular o local de escolha devido ao seu grande calibre e facilidade de acesso. 0 local indicado para colheita de sangue nos caninos e felinos sao as veias jugulares, cefálicas ou safenas laterais.

Tipos de amostras:

Para muitas provas bioquímicas e imunológicas, se faz necessário o uso do sangue total colhido em tuba de tampa vermelha e, para tanto, não se deve utilizar nenhum preservante (sem anticoagulante). Portanto, as amostras devem ser preservadas em função do exame a ser realizado. De forma mais clara, as amostras biológicas destinadas ao DIAVET podem ser classificadas da seguinte maneira:

A) SANGUE TOTAL:

lndicado para hemograma completo (contagem global de hemacias, leucócitos, plaquetas, determinação do hematócrito, VCM; HCM; CHCM, e dosagem de hemoglobina), dosagem de pH metabóIitos sanguíneos (corpos cetônicos, acido lactico, amônia) e presença quantitativa de algum metal (chumbo, zinco, manganes, molibdenio e cadmio). Colher par punção venosa utilizando o frasco a vácuo ou puncionar a veia com seringa e coletar de 1,5 a 3 ml.

de sangue. Este procedimento deve demorar no máxima 2 minutos. Homogeneizar par, no mínimo, 30 segundos de maneira sutil e imediata a coleta. Para eritrograma, leucogramae pesquisa de hemoparasitas, coletar em tuba contendo

EDTA (tampa roxa), podendo tambem ser realizados esfregai;os sangufneos. Manter as amostra de sangue refrigerado (2 e 8°C) par no maxima 48 horas. Nunca congelar amostras destinadas a hemograma.

B) SORO SANGUINEO OU SANGUE TOTAL COLHIDO EM TUBO DE TAMPA VERMELHA:

É a porção do sangue que pode ser separada do coágulo por decantação, após o sangue total ter centrifugado. E utilizado para os seguintes exames: proteínas, eletrólitos, microelementos, metabolitos, lipidograma, atividades enzimáticas, sorológicas e imunosorologias. O soro, obtido após centrifugação ou coagulação o do sangue, e preferível para exame. Cuidados devem ser tomados quanta ao calibre da agulha, pressão no embolo, tempo de garroteamento, depósito no tubo manipulação do material para que se evite hemólise. Deve ser coletado de 2 a 5 ml de sangue de cada animal (a quantidade poderá ser maior ou menor, dependendo da espécie e do porte do animal) em frasco limpo e seco, com alternativa de incliná-lo imediatamente após a coleta, deixando coagular em temperatura ambiente

C)PLASMA SANGUINEO - TUBO DE TAMPA AZUL, CINZA, PRETA, VERDE OU ROXA:

É o sobrenadante do sangue total com anticoagulante ap6s centrifugação das células do sangue. Esse procedimento e realizado no DIAVET e e indicado para determinai;ao de fatores da coagulação e de certos metab6Iitos. Para separação adequada da parte liquida do sangue das células e necessário uma centrifugação a 3000 rpm, par um período de 510 minutos, sob refrigeração a 4°C ou temperatura ambiente, dependendo do exame realizado.

Anticoagulantes:

É o sobrenadante do sangue total com anticoagulante ap6s centrifugação das células do sangue. Esse procedimento e realizado no DIAVET e e indicado para determinai;ao de fatores da coagulação e de certos metab6Iitos. Para separação adequada da parte liquida do sangue das células e necessário uma centrifugação a 3000 rpm, par um período de 510 minutos, sob refrigeração a 4°C ou temperatura ambiente, dependendo do exame realizado.

A) EDTA (ACIDO ETILENO - DIAMINOTETRACETICO) - TUBO DE TAMPA ROXA:

Este anticoagulante age quelando os sais de cálcio, que são fundamentais para os processos de formação do coágulo. E o anticoagulante de escolha em hematologia das principais espécies domésticas, pois, se usado corretamente, e o que melhor preserva as células e suas caracterfsticasmorfol6gicas.

B) HEPARINA-TUBO DE TAMPA VERDE:

A heparina evita a coagulação sanguínea par interferir especificamente na conversão da protrombina em trombina. Pode ser usada em hematologia embora possa interferir um pouco com a coloração das células, em especial dos leuc6citos. Não e efetiva para período superior a um dia. Pode ser empregada quando se pretende fazer análises hematológicas e bioquímicas em uma mesma amostra. Após 24 horas ocorre degeneração o nuclear e citoplasmática dos neutr6filos e degeneração citoplasmática dos monócitos.

C)FLUORETO DE SODIO -TUBO DE TAMPA PRETA OU CINZA:

É empregado na conservação do sangue para dosagem de glicose. Atua sabre as hemácias inibindo o processo de glic6Iise, mantendo este metab6Iito par mais tempo na amostra ate a dosagem.

D) CITRATO DE SODIO - TUBO DE TAMPA AZUL:

O citrato de sódio age quelando cálcio impedindo o processo de coagulação. E empregado na conservação do sangue para as análises de fibrinogênio, tempo de protrombina, tempo de tromboplastina parcial ativada, ou seja hemostasia secundaria.

E) ESFREGAÇO SANGUÍNEO:

Usado para pesquisa de hemoparasitas com Anaplasma, Babesia, Filaria, Ehrlichia e Trypanosoma, e também para características morfológicas dos eritrócitos, para contagem diferencial de leucócitos, contagem de plaquetas e eritroblastos devendo-se colher sangue periférico. Também pode ser confeccionado a partir de amostra de sangue de ponta de orelha ou cauda para melhor pesquisa de hemoparasitas, principalmente Babesia spp, Mycoplasma spp. e E Rangelia Vitalli.

Como fazer um esfregaço:

- Utilizar uma lâmina em superfície plana.

-Colocar uma pequena gota de sangue na extremidade da lâmina.

·-Com uma segunda lâmina colocar o seu rebordo livre contra a superfície da primeira, em frente gota de sangue, formando um ângulo de 45°.

-Realizar um movimento para trás de modo que entre em cantata com a gota de sangue, pressionando-a até que a gota se espalhe par toda a borda da lâmina.

-Impelir a lâmina, guardando sempre o mesmo ângulo, em um s6 movimento, firme e uniforme, sem separar uma lâmina da outra. Forma-se então uma delgada camada de sangue.

-Secar rapidamente ao ar, conservar em temperatura ambiente e identificar com lápis na extremidade da lâmina sabre o próprio esfregaço, depois de seco ao ar.

Indicada para realização de mielograma e pesquisa de hemoparasitas, pode ser obtida par punção em ossos chatos e longos (úmero, crista ilíaca, esterno, etc). A punção deve ser realizada com agulha contendo mandril monofacetado e dispositivo regulador de comprimento, que confere mais segurança ao profissional e eficácia ao procedimento

(evitando entupimento e contaminação da amostra). A medula 6ssea coagula rapidamente, mantenha na seringa de coleta anticoagulante EDTA 5%, evitando assim a coagulação do material desde sua coleta até confecção das lâminas. Para realização do mielograma, envie juntamente com o material coletado em tuba de tampa roxa, 3 a 5 lâminas confeccionados logo ap6s a coleta para preservar a morfologia das células. Outros exames podem ser realizados com a mesma amostra de medula 6ssea encaminhada, coma reação em cadeira da polimerase (PCR) para leishimaniose, erliquiose, dentre outros hemoparasitas.